LipiDye高靈敏度的脂滴活細胞成像熒光染料

高靈敏度的脂滴活細胞成像熒光染料

LipiDye<Lipid Droplet Green>

LipiDye是一種可以對脂滴進行高靈敏染色的新型熒光素。與以往的脂滴檢測色素Nile Red相比顯示出高S/N比。活細胞和固定細胞均可使用。

※本產品用于研究，不可用于臨床。

※本產品由名古屋大學轉化生命分子研究所（ITbM）的研究成果商品化而來

Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54:4539～4543 (2015).

◆脂滴（Lipid droplet）的含義

脂滴（Lipid droplet）是在脂肪細胞（Adipocyte）中發現的巨大的中性脂質的結塊，主要成分是甘油三酯（Triglyceride）和甾醇酯（Sterol Ester）的單分子層結構體。脂滴被認為是儲存細胞內中性脂質的細胞器，并且有較多肥胖和疾病相關的報道。最近，除了脂肪細胞，還在肝細胞、平滑肌細胞、神經膠質細胞等各種細胞中發現了脂滴。這些發現明確了其不僅僅是作為中性脂質的儲存場所，還有抑制代謝和基因表達調節等各種功能。非脂肪細胞的脂滴在1μm以下，與脂肪細胞中的10~100μm的脂滴相比較小。目漸多評論認為，脂滴是每個細胞中都存在的普遍的小型細胞器。實際上，近年來與脂滴研究相關的研究報告數量顯著增加（據Pubmed的調查）。

◆脂類自噬（Lipophagy）：脂滴的自噬

自2009年Nature初次報道自噬是脂滴分解的過程之后*，脂類自噬（Lipophagy）作為自噬抑制的脂質代謝引起人們的關注。脂類自噬的形成以及活性化機制作為基于脂滴分解的脂質代謝的新過程，期待它可以有效地預防脂質異常的疾病。

＊Singh, et al., Nature., 458: 1131-1135． （2009）．

◆特點

●　LipiDye是依存溶劑的分子極性發光的熒光素，選擇性地吸收脂滴，使其在中性脂質中發出綠色的熒光。

●　由于其在水溶液中沒有熒光，所以細胞質中的非特異性發光被明顯抑制，與以往的色素相比具有高S/N比。

●　也可用于脂滴的實時成像和固定細胞中的觀察。

●　具有很高的光穩定性，是實時成像的理想選擇。

●　低濃度的使用量（1 μM）就可獲得足夠地靈敏度，工作濃度（1 μM）幾乎不顯示細胞毒性。

◆化合物信息

●　IUPAC name: 1,3-Diphenyl-2-[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]benzo[b]phosphole-P-oxide

●　化學式 : C₃₈H₂₈NOP

●　分子量 : 545.58 g/mol

●　溶解度 : 可溶于DMSO

◆波長

Excitation/ Emission: 405 nm / 521～530 nm

※LipiDye用一般的綠色熒光色素使用的濾鏡（FITC和GFP等）無法檢測。請使用合適的濾鏡。

◆使用案例

與Nile Red比較

脂肪細胞的脂滴用LipiDye或者Nile Red染色，檢測箭頭（左圖）指示范圍的熒光強度（右圖）。無論是靈敏度還是S/N比LipiDye都比Nile Red高。脂滴中的熒光強度LipiDye較強（distance 0～10 μm），細胞質中的非特異性熒光信號Nile Red較強（distance 10～20 μm）。

脂肪前驅細胞3T3-L1細胞的分化

用LipiDye觀察脂肪前驅細胞3T3-L1的分化過程。可以看出，分化過程中脂滴不斷變大。

比較固定細胞

比較培養脂肪細胞用多聚甲醛固定后染色的情況（左圖）和活細胞染色后用多聚甲醛固定的情況（右圖），無論哪一種情況都可以高靈敏度地檢測出脂滴。

※甲醇固定可能會影響到脂滴的構造，不建議使用。請使用多聚甲醛等的交聯型固定試劑。

驗證光穩定性

評價了LipiDye和BODIPY493/503、Fluorescein、Prodan隨著照射時間的光穩定性。LipiDye與其他的熒光素相比顯示出了較高的光穩定性。

驗證細胞毒性

用MTT法評價LipiDye的細胞毒性。LipiDye幾乎不影響細胞存活率。

◆相關產品

※ 本頁面產品僅供研究用，研究以外不可使用。